实验目的:此次实验是以肿瘤细胞为样本,选用一体式超声波细胞破碎仪对细胞样品进行超声破碎,以便后续对细胞样品的蛋白提取。
实验步骤:
1、仪器准备:一体式超声波细胞破碎仪XM-650T
2、样品准备:培养的肿瘤细胞,从培养皿中刮下来放在1.5ml管中,加入100μl裂解液,置于冰上孵育30min。
3、仪器操作:打开仪器,使用2mm探头,设置参数:功率为10%,工作3s、间歇5s,间歇模式,总时间30s。
4、实验结束:置于4℃离心机13000rpm离心20min,观察样品管内样品破碎效果,
实验结果:
5、观察到样品已完全破碎,离心后的样品呈澄清上清无杂质,沉淀物为细胞碎片。
实验注意事项:
1.为保障蛋白样品活性,操作全程在冰上进行
2.因样品量较少,超声功率尽量调小,时间设为间隔模式
3.每个样品不同,超声完成一个样品后,用纯水清洗后进行下一个